產(chǎn)品名稱：pRB視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白ELISA試劑盒

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產(chǎn)品名稱：pRB視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白ELISA試劑盒
英文名稱：retinoblastoma tumor suppressor protein,pRB ELISA Kit

貨號(hào)：A097598

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測(cè)目的：用于檢測(cè)血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.

檢測(cè)種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、等動(dòng)植物。

實(shí)驗(yàn)流程:

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時(shí)；

3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100μL，37°C孵育1小時(shí)；

4. 洗板3次；

5. 加檢測(cè)溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

注意事項(xiàng):

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說(shuō)明書有異，以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)

Cilnidipine　132203-70-4　100mg

Tryptanthrin　13220-57-0　1mg

Tryptanthrin　13220-57-0　5mg

Tryptanthrin　13220-57-0　10mg

Tryptanthrin　13220-57-0　25mg

Pheniramine Maleate　132-20-7　10mM(in1mLDMSO)

Pheniramine Maleate　132-20-7　50mg

Docosahexaenoyl PAF C-16　132213-85-5　1mg

Docosahexaenoyl PAF C-16　132213-85-5　5mg

Docosahexaenoyl PAF C-16　132213-85-5　10mg

Docosahexaenoyl PAF C-16　132213-85-5　25mg

CATPB　1322598-09-3　10mg

CATPB　1322598-09-3　50mg

Tau Peptide (74-102) (Exon 3/Insert 2 Domain)　1322695-34-0　0.5mg

Tau Peptide (74-102) (Exon 3/Insert 2 Domain)　1322695-34-0　1mg

pRB視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白ELISA試劑盒小鼠垂體瘤豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna　　大鼠12-羥基二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒，英文名：12-HETE ELISA Kit

神經(jīng)元完全培養(yǎng)基MuM-2C(眼脈絡(luò)黑色素瘤)　　豚鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒，英文名：αHSG ELISA Kit

熒光假單胞 Pseudomonas fluorescens植物桿 Lactobacillus plantarum　　人線粒體琥珀酸鹽半醛脫氫酶(SSADH)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠幽門螺旋IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒，英文名：Hp-IgG ELISA Kit

單孢蟲(chóng)道酵母 Ambrosiozyma manospora甘藍(lán)黑腐病禾谷類致病變種 Xanthomonas campestris pv. cerealis　　ELISA Kit for Human Beta-arrestin-2小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒，英文名：AFP-L3 ELISA Kit

HK-2, 腎皮質(zhì)近曲小管上皮大鼠肝星形完全培養(yǎng)基　　ELISA Kit for Human Aquaporin-5小鼠前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒，英文名：PGF ELISA Kit

臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis青春雙歧桿 Bifidobacterium adolensentis　　ELISA Kit for Corticosterone小鼠金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA試劑盒，英文名：MT-2 ELISA Kit

香菇 Lentinula edodes黑曲霉 Aspergillus niger　　ELISA Kit for Human CD59 glycoprotein小鼠多肽YY(PYY)ELISA試劑盒，英文名：PYY ELISA Kit

胰腺大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum　　ELISA Kit for Human Cytotoxic T-lymphocyte protein 4小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒，英文名：β-glucosidase ELISA Kit

前列腺上皮完全培養(yǎng)基Raji(Burkitt's瘤)　　ELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 10小鼠血小板內(nèi)皮粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒，英文名：PECAM1 ELISA Kit

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae桿屬 Lactobacillus sp.　　ELISA Kit for Human Dentin sialophosphoprotein小鼠早期生長(zhǎng)應(yīng)答因子2(EGR2)ELISA試劑盒，英文名：EGR2 ELISA Kit

操作流程：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。