產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:兔外根鞘細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號:FS-016525
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
兔外根鞘細(xì)胞采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
詳情介紹:

細(xì)胞處理方法:

產(chǎn)品名稱以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。

一.貼壁細(xì)胞

客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養(yǎng)瓶外部。

肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。

顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。

用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。

1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

二.懸浮細(xì)胞

1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過的)培養(yǎng)瓶外部。

2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。

3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。

5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。


公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。

產(chǎn)品名稱 兔外根鞘細(xì)胞
規(guī)格 詳見說明書
貨號

FS-016525

培養(yǎng)操作步驟 :

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

L-蘇氨酸

植物源成分PCR檢測試劑盒

ACE medium

LITMUS28

人類白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)ELISA Kit

HFL1細(xì)胞株

pKH80

磷酸氫二鈉

單純皰疹病毒PCR檢測試劑盒

pZFHD1-2(pZFHD12)

細(xì)胞計數(shù)液

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit

CCC-HBE-2[CCCHBE2]細(xì)胞株

文多靈;文朵靈 英文名稱:Vindoline; Wen Duoling 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

兔外根鞘細(xì)胞長春瑞濱 英文名稱:Changchun vinorelbine 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

長春花堿;長春堿 英文名稱:Changchun flower alkali alkali; Changchun 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

長春新堿;新長春堿 英文名稱:Vincristine; Changchun new alkali 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

長春質(zhì)堿 英文名稱:Changchun alkali 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

益母草堿;益母草堿鹽,益母草堿 英文名稱:Leonurine hydrochloride; Leonurine hydrochloride, Leonurine 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

商陸皂苷元 英文名稱:Phytolacca americana sapogenin 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

奈素;3,5,7-三羥基-4’-甲氧基 英文名稱:Kaempferol; 3,5,7- three '- hydroxy -4 methoxy 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

纖細(xì)薯蕷皂苷 英文名稱:Diosgenin 3-o-beta-gracillimatrioside 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

原薯蕷皂苷 英文名稱:Protodioscin 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

甲基原薯蕷皂苷 英文名稱:Methyl protodioscin 規(guī)格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光

 


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