操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
服務(wù)：所有的檢測試劑盒均免費(fèi)代測，您只需要將您準(zhǔn)備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)！
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產(chǎn)品名稱 |
多配體蛋白聚糖4試劑盒 |
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貨號 |
96T/48T |
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貨號 |
FS-016118 |
產(chǎn)品名稱：多配體蛋白聚糖4試劑盒
貨號：FS-016118
規(guī)格：96T/48T
保存；2-8℃。
檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。
試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
注意事項(xiàng):
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)
IQGAP1支架蛋白抗原 0.5mg
MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28)線粒體核糖體蛋白L28(抗原) 0.5mg
PAR-2 (Protease-activated receptors-2)蛋白酶激活受體-2抗原 0.5mg
Shiga-like toxin IIe variant subunit A[Escherichia coli 0139]大腸桿志賀樣體蛋白（O139型） 0.5mg
TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand)腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗原 0.5mg
Connexin-45(CX45)間隙連接蛋白45(抗原) 0.5mg
Metal ion transporter擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(抗原) 0.5mg
TPO(Thyroid Peroxidase)甲狀過氧化物酶(抗原) 0.5mg
CD33CD33抗原（人） 0.5mg
Metronidazole/OVA甲硝唑偶聯(lián)雞卵白蛋白 1mg
OVA/FITC熒光素標(biāo)記雞卵白蛋白 0.3ml
Mouse IgG/Cy7熒光素Cy7標(biāo)記小鼠IgG(細(xì)胞流式同型對照) 0.1ml
多配體蛋白聚糖4試劑盒通用試劑 高氯酸鋰 三水合物 Lithium perchlorate trihydrate 13453-78-6 100G
通用試劑 氫化鋰 Lithium hydride,≥97% 7580-67-8 100G
通用試劑 DL-乳酸鋰 DL-Lactic acid，lithium salt 867-55-0 5G
通用試劑 硝酸鋰 Lithium nitrate 7790-69-4 500G
通用試劑 磷酸二氫鋁 Aluminium dihydrogen phosphate 13530-50-2 100G
通用試劑 無水氯化鋁 Aluminum chloride,anhydrous 7446-70-0 500G
通用試劑 乙酰丙酮鋁 Aluminum triacetylacetone 13963-57-0 100G
通用試劑 堿式乙酸鋁 Aluminum acetate basic 142-03-0 250G
通用試劑 氟化鉛 lead fluoride 7783-46-2 25G
通用試劑 磷酸鋁 Aluminum phosphate 7784-30-7 250G
通用試劑 酒石酸鉛 Lead tartrate,≥ 99.0 % 815-84-9 25G
通用試劑 堿式乙酸鉛 Lead subacetate 1335-32-6 500G