貼壁細胞收到處理過程

日期:2024-09-20 12:11
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摘要: 貼壁細胞收到處理過程: 1、客戶接收到細胞,用75%的酒精消(建議配制75%酒精的水是滅 菌過的)培養(yǎng)瓶外部。 2、肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。 3、顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。 4、嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。 5、將細胞培養(yǎng)瓶...

貼壁細胞收到處理過程:

1、客戶接收到細胞,用75%的酒精消(建議配制75%酒精的水是滅 菌過的)培養(yǎng)瓶外部。

2、肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。

3、顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

4、嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

5、將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

6、用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。