簡(jiǎn)述ELISA試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)

小結(jié)了ELISA試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)如下：

首先、規(guī)范曲線(xiàn)

1.定量辦法：規(guī)范曲線(xiàn)zui少由5個(gè)濃度組成，測(cè)定次數(shù)不少于5次，以斷定作業(yè)濃度規(guī)模和IC50規(guī)模。

2.定性辦法：作業(yè)濃度規(guī)模經(jīng)過(guò)陰性、臨界值濃度和陽(yáng)性的樣品測(cè)定來(lái)斷定，每個(gè)濃度重復(fù)不少于5次，濃度與響應(yīng)值之間應(yīng)有必定的。

其次、檢查限和定量限

1.檢查限：20份空白樣品測(cè)定均值加3倍規(guī)范差。

2.定量限：應(yīng)大于規(guī)范曲線(xiàn)中zui低濃度點(diǎn)。關(guān)于定量辦法，應(yīng)對(duì)該濃度樣品zui少測(cè)定6次進(jìn)行驗(yàn)證，而不能經(jīng)過(guò)外延法揣度。

第三、臨界值（cut-off值）的斷定

關(guān)于有zui高殘留定量的藥wu，檢查辦法的臨界值為20份增加MRL濃度的樣品重復(fù)3次測(cè)定的均值減去1.64倍規(guī)范差，即95%置信限處。

關(guān)于禁用藥wu，檢查辦法的臨界值為定量限，該值應(yīng)到達(dá)公認(rèn)的目標(biāo)。

第四、ELISA試劑盒精密度和準(zhǔn)確度

關(guān)于有zui高殘留定量的藥wu，增加濃度為MRL及MRL上下各一個(gè)濃度；關(guān)于禁用藥wu，增加濃度為定量限和2倍定量限，每個(gè)增加濃度zui少測(cè)定5個(gè)平行樣，并zui少進(jìn)行3批實(shí)驗(yàn)（不一樣檢查日期，不一樣規(guī)范曲線(xiàn)，不一樣批次試劑盒）。

1.準(zhǔn)確度：回收率規(guī)模大于40%或契合相應(yīng)檢查規(guī)范的要求。

2.精密度：以變異系數(shù)表明。

批內(nèi)變異系數(shù)：每批平行樣之間的變異系數(shù)小于或等于25%，關(guān)于禁用藥wu小于或等于30%.

批間變異系數(shù)：一切樣品之間的變異系數(shù)值小于或等于30%，elisa試劑盒關(guān)于禁用藥wu小于或等于40%.

定性辦法：陰性和陽(yáng)性樣品各測(cè)定不少于50份，斷定假陽(yáng)性率和假陰性率。

第五、穿插反應(yīng)

試劑盒與待檢藥wu類(lèi)似物、代謝物或一起存在的藥wu測(cè)定穿插反應(yīng)率。

第六、保留期

保留期經(jīng)過(guò)保留條件的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果斷定。

第七、復(fù)核實(shí)驗(yàn)

1.定量辦法：檢查限、IC50以及zui少兩個(gè)增加濃度的準(zhǔn)確度和精密度，并與理化辦法（或與具代表性進(jìn)口試劑盒）對(duì)比。

2.定性辦法：檢查限、假陽(yáng)性率和假陰性率。