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ELISA試驗(yàn)樣本內(nèi)源性干擾因素
日期：2024-09-20 07:31
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摘要：
內(nèi)源性干擾因素包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免yi 球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等。
1、1類風(fēng)濕因子在類風(fēng)濕患者及正常人血清中，常含有較高或不同濃度的類風(fēng)濕因子(RF)，其一般為IgM型，亦有IgG和IgA型，具有與變性IgG產(chǎn)生非特異結(jié)合的特點(diǎn)，因?yàn)樵贓LISA測(cè)定中，其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨后加入的酶標(biāo)的特異抗體IgG結(jié)合，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。避免其發(fā)生的方法有：
①用F(ab)2替代完整的IgG。
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理。
③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀...
內(nèi)源性干擾因素包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免yi 球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等。
1、1類風(fēng)濕因子在類風(fēng)濕患者及正常人血清中，常含有較高或不同濃度的類風(fēng)濕因子(RF)，其一般為IgM型，亦有IgG和IgA型，具有與變性IgG產(chǎn)生非特異結(jié)合的特點(diǎn)，因?yàn)樵贓LISA測(cè)定中，其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨后加入的酶標(biāo)的特異抗體IgG結(jié)合，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。避免其發(fā)生的方法有：
①用F(ab)2替代完整的IgG。
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理。
③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
2、補(bǔ)體在固相酶免yi 測(cè)定中，來自哺乳動(dòng)物的固相抗體和酶標(biāo)二抗均有激活人補(bǔ)體系統(tǒng)的功能。一方面，固相抗體和酶標(biāo)二抗可因其吸附及結(jié)合過程中抗體分子發(fā)生變構(gòu)，使Fc段的補(bǔ)體C1q結(jié)合點(diǎn)暴露出來，使C1q成為一個(gè)中介物將二者交聯(lián)起來出現(xiàn)假陽性結(jié)果。另一方面，固相抗體也會(huì)因?yàn)榛罨a(bǔ)體的結(jié)合，封閉抗體和抗原的表位結(jié)合能力而引起假陰性。解決的辦法是：
①用EDTA稀釋標(biāo)本。
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活。