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ELISA試驗標準曲線需注意細節(jié)

日期：2024-09-19 07:46
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摘要： 做ELISA標準曲線時需要重點注意的細節(jié)問題： 1、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限；而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。 2、檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。 3、標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。 4、做出的標...

做ELISA標準曲線時需要重點注意的細節(jié)問題：


1、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限；而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。


2、檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。


3、標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。


4、做出的標準曲線相關系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?，但一般來說，相關系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999。


5、樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結果無從談起。


6、好采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。