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產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因
日期：2024-09-20 13:35
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摘要：
產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些？如何解決？
1、抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過(guò)縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制。這是*重要的一條。
2、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。
3、內(nèi)源性過(guò)氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細(xì)胞多的組織），需要通過(guò)延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來(lái)降低背景染色。
4、非特異性組分與抗體結(jié)合，這需要通過(guò)延長(zhǎng)二抗來(lái)源的動(dòng)物免yi 血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來(lái)加強(qiáng)封閉效果...
產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些？如何解決？
1、抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過(guò)縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制。這是*重要的一條。
2、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。
3、內(nèi)源性過(guò)氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細(xì)胞多的組織），需要通過(guò)延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來(lái)降低背景染色。
4、非特異性組分與抗體結(jié)合，這需要通過(guò)延長(zhǎng)二抗來(lái)源的動(dòng)物免yi 血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來(lái)加強(qiáng)封閉效果。
5、DAB孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或濃度過(guò)高。
6、PBS沖洗不充分，殘留抗體結(jié)果增強(qiáng)著色，在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要。
7、標(biāo)本染色過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)干片，這容易增強(qiáng)非特異性著色。