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分光光度法的簡(jiǎn)介
日期：2024-09-20 13:54
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摘要：
分光光度法的簡(jiǎn)介
分光光度法（visible spectrophotometry）是2016年國(guó)內(nèi)科學(xué)技術(shù)名詞審定委員會(huì)公布的化學(xué)名詞。
分光光度法（visible spectrophotometry）是2016年國(guó)內(nèi)科學(xué)技術(shù)名詞審定委員會(huì)公布的化學(xué)名詞。
定義
分光光度法根據(jù)被測(cè)量物質(zhì)分子本身或借助顯色劑顯色后對(duì)可見波段范圍單色光的吸收或反射光譜特性來進(jìn)行物質(zhì)的定量、定性或結(jié)構(gòu)分析的一種方法。
核酸的定量是分光光度計(jì)使用頻率*高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的*高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260 nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一，因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對(duì)應(yīng)的系數(shù)。如：1OD 的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。測(cè)試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。測(cè)試前，選擇正確的程序，輸入原液和稀釋液的體積，爾后測(cè)試空白液和樣品液。然而，實(shí)驗(yàn)并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實(shí)驗(yàn)者***的問題。靈敏度越高的儀器，表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。
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