ELISA競爭法記錄結果幾種方法

競爭法所測定的抗原只要有一個結合部位即可，因此，對小分子抗原如激su和藥wu之類的測定常用此法。該法的優(yōu)點是快，因為只有一個保溫洗滌過程。但需用較多量的酶標記抗原為其缺點。

一、  試驗的重復性（精que度）

有二種方法來檢驗試驗的精que度：通常用變異系數(shù)來表示：1、幾個樣品用ELISA法同時進行多次測定求出CV%；2、不同時間對不同操作者對某幾個樣進行多次測定求出變異系數(shù)。CV是個體參數(shù)標準差與平均數(shù)的比率。

S / X ＝ CV ，CV應低10%，不應大于10～15%。

不論目測或分光光度計測定，均可作一個稀釋度或一系列稀釋度測定，一般常規(guī)診斷只用一個稀釋度判斷陽性或陰性就可以了，這樣比較方便，現(xiàn)在推薦傳染病的血清診斷用1：200一個稀釋度。有些需要精que定量的，可作一系列稀釋度測定。

記錄結果有下列幾種方法：

1、“+”或“-”：所有超過規(guī)定的OD值（如OD，0.4）的標本均屬陽性，此規(guī)定OD值是根據(jù)事先測定大量陰性標本所取得的，此規(guī)定值是陰性標本的上限?；蛘咭砸唤M陰性標本OD平均值加2～3個標準差作為陽性閾值。

2、直接以OD值來表示，如0.4、0.7、1.2，OD值越大，陽性反應越強，但此數(shù)值是在固定實驗條件下得到的結果，而且每次實驗都要有參考標本作對照。

3、以終點滴度表示：將標本作連續(xù)稀釋，*高稀釋度能出現(xiàn)陽性反應者（即OD值仍大于陽性閾值，即為該標本的滴度。

4、以“比值表示：求出被檢標本的OD值與一組陰性標本OD值的比值，例如為陰性標本的2倍或3倍，即為陽性，比值小于2.1而大于1.5為可疑，<1.5為陰性。

測定標本OD值-空白OD值

陰性對照OD值-空白OD值

如在此測定時以空白校正“O”點。

5、以“單位”來表示：在測定被檢標本的同時，再測定一個含已知單位數(shù)的陽性參考血清，用不同稀釋度作ELISA檢測后，以OD值為縱坐標，單位數(shù)為橫坐標，畫出標準曲線。以后可根據(jù)被檢標本的OD值，從曲線上找出相應的單位數(shù)，再乘于血清的稀釋倍數(shù)，即可得出被檢標本的單位數(shù)。

作試驗時的陰性參考血清*好不要顯色，否則會對結果判斷帶來困難，特別在目測時，當陽性標本OD值>2.0時，應作適當稀釋后再作測定。

二、  對使用儀器要求

所用儀器如吸管、燒杯試管都要清潔，用于酶結合和底物的吸管和容器一定要分開。試劑要求標準化。