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講解ELISA試劑盒效果"花板"的問(wèn)題

日期:2024-09-20 13:55
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摘要: 關(guān)于ELISA試劑盒效果"花板"的問(wèn)題對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)造成了很大影響,往往會(huì)使檢測(cè)者做出誤判,是實(shí)驗(yàn)中有必要要注意和避免的。 針對(duì)這種"花板"現(xiàn)象我們通過(guò)屢次實(shí)驗(yàn)的分析和判別,總結(jié)了一些閱歷,分析如下: 1 、標(biāo)本、試劑、儀器 1.1 標(biāo)本 出入境人員的血液標(biāo)本。 1.2 試劑 HBsAg、HCV、HIV、梅毒試劑均為不同廠家的ELISA試劑盒。 1.3 儀器 LD4-2型腦心計(jì)BID RAD1575型洗板機(jī)BID RAD550酶標(biāo)儀。 2、 辦法 全部被檢出入境人員的血液標(biāo)本,按照各個(gè)廠家供應(yīng)的ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行HBsAg-HCV-HIV梅毒等查驗(yàn)項(xiàng)目操作。全部試劑均在有用期內(nèi)...
 關(guān)于ELISA試劑盒效果"花板"的問(wèn)題對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)造成了很大影響,往往會(huì)使檢測(cè)者做出誤判,是實(shí)驗(yàn)中有必要要注意和避免的。
針對(duì)這種"花板"現(xiàn)象我們通過(guò)屢次實(shí)驗(yàn)的分析和判別,總結(jié)了一些閱歷,分析如下:
1 、標(biāo)本、試劑、儀器
1.1 標(biāo)本 出入境人員的血液標(biāo)本。
1.2 試劑 HBsAg、HCV、HIV、梅毒試劑均為不同廠家的ELISA試劑盒。
1.3 儀器 LD4-2型腦心計(jì)BID RAD1575型洗板機(jī)BID RAD550酶標(biāo)儀。
2、 辦法
全部被檢出入境人員的血液標(biāo)本,按照各個(gè)廠家供應(yīng)的ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行HBsAg-HCV-HIV梅毒等查驗(yàn)項(xiàng)目操作。全部試劑均在有用期內(nèi)運(yùn)用。
3 、效果
所運(yùn)用不同廠家的試劑有時(shí)會(huì)出現(xiàn)"花板"問(wèn)題。
4 、分析
在全部標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)的進(jìn)程中,所用的儀器及加樣進(jìn)程都處于正常狀況的情況下,進(jìn)程均按照各種試劑說(shuō)明書(shū)的要求去做,掃除實(shí)驗(yàn)所用儀器和操作進(jìn)程對(duì)實(shí)驗(yàn)效果的影響外,ELISA試劑盒內(nèi)的空白、陰性和陽(yáng)性對(duì)照以及室內(nèi)質(zhì)控值都很正常,只要檢測(cè)的血液標(biāo)本情況異常。根據(jù)國(guó)家和疾控中心陳述陽(yáng)性率的份額不該該是很高的情況下,HBsAg在用ELISA之前都通過(guò)了快速金標(biāo)試劑的檢測(cè),陽(yáng)性標(biāo)本得到了必定的控制。因此,原因可能是在標(biāo)本的處理,特別是放置時(shí)間、離心速度和離心時(shí)間方面的問(wèn)題。所以,標(biāo)本的處理就成為實(shí)驗(yàn)效果的首要可疑要素。


為了避免"花板"現(xiàn)象的出現(xiàn),下降檢測(cè)的假陽(yáng)性率,獲取準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)效果,應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作便當(dāng)省時(shí)的ELISA試劑。

運(yùn)用ELISA試劑盒對(duì)血液HBsAg-HCV-HIV及梅毒等實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的效果中,空白和陰性,陽(yáng)性對(duì)照以及室內(nèi)質(zhì)控孔效果正常,根據(jù)衛(wèi)生部臨檢中心供應(yīng)的數(shù)據(jù),HBsAg0.5ng1ng-HCV-HIV梅毒正常規(guī)劃均為2NCU,但血液標(biāo)本孔的OD值比較高(大多數(shù)OD值≥0.070)。標(biāo)本的陽(yáng)性率很高,每板除對(duì)照孔外,有時(shí)陽(yáng)性高達(dá)10孔之多,而大多數(shù)真陽(yáng)性標(biāo)本都出現(xiàn)弱陽(yáng)性效果。